1. Klinik dışı çalışmalar neler içerir?
Cevap:Klinik dışı deneyler arasında farmakoloji çalışmaları, genel toksisite testleri, toksikokinetik ve klinik dışı farmakokinetik deneyleri, üreme toksisitesi testleri, genotoksisite testleri, karsinojenisite ve diğer testler (fototoksisite, bağımlılık, immünotoksisite) vb. yer alır. Kombinasyon tedavisi durumunda, kombinasyon tedavisinin klinik dışı güvenlik çalışmaları da yapılabilir. Belirli bir yüksek oran için (toplam sistemik maruziyetin %10'undan fazlası ve hayvan çalışmalarındaki maruziyet düzeyi insan maruziyetinden daha düşüktür), metabolitlerin klinik dışı güvenlik çalışmalarının yapılması gerekli olabilir.
2. Klinik dışı güvenlik değerlendirmesinin amacı nedir?
Cevap:Klinik dışı güvenlik değerlendirmesinin amacı genellikle hedef organlarla ilgili toksisite reaksiyon özelliklerinin, doza bağımlılığın, maruz kalma ilişkisinin ve potansiyel geri dönüşlülüğün aydınlatılmasını içerir. Bu bilgi, insanlardaki klinik deneyler için güvenli başlangıç dozunu ve doz aralığını tahmin etmek için kullanılabilir (daha önce belirtildiği gibi, önerilen maksimum başlangıç dozu olan MRSD'yi hesaplamak için toksikoloji deneylerinde NOAEL'in elde edilmesi gerekir) ve potansiyel advers reaksiyonlar için klinik izleme göstergelerini belirlemek için kullanılabilir.
3. İnsanlarda ilk-denemeler için-hangi klinik dışı çalışmalar gereklidir?
Cevap:Bu soru için öncelikle ilacın türüne açıklık getirmek gerekiyor. ICH M3 (R2), ilaç geliştirmedeki yaygın durumlara uygulanabilir ve genel rehberlik ilkeleri sağlar. Biyolojikler için klinik dışı çalışmalar ICH S6 gerekliliklerine göre yapılmalıdır.
⑴Farmakokinetik:IND'nin sunulmasından önce, araştırma ürününün farklı türlerdeki metabolizmasına ilişkin veriler ve insanlarda in vitro metabolizma verilerinin yanı sıra plazma proteinlerine bağlanma hızına ilişkin veriler yeterlidir. Emilim, dağılım, in vivo metabolizma ve atılım hakkındaki bilgiler, büyük-ölçekli klinik çalışmalardan (genellikle 3. aşama) önce tamamlanmalıdır. PK absorpsiyon deneyleri, ilacın farklı türlerdeki PK özelliklerini daha iyi anlamak için genellikle IND sunumundan ve PCC belirlemesinden önce birden fazla türde gerçekleştirilir, ancak burada buna gerek yoktur, bu biraz tuhaftır.
⑵Güvenlik Farmakolojisi:Güvenlik farmakolojisi standart testlerinin bir kombinasyonu olan IND'nin sunulmasından önce kardiyovasküler, merkezi sinir ve solunum sistemleri üzerindeki etkilerin değerlendirilmesi tamamlanmalıdır. Gerekirse klinik araştırmalar sırasında tamamlayıcı güvenlilik farmakolojisi deneyleri yapılabilir.
⑶Tekrarlanan Doz Toksisitesi:Genellikle kısa-dönemli bir kronik toksisite testi, IND'nin erken doz şemasına göre düzenlenir. Dozaj süresinin daha sonra uzatılması gerekiyorsa, bunu desteklemek için daha uzun-dönemli bir kronik toksisite testi gerekir.
⑷Genotoksisite:Nispeten düşük maliyetle genotoksisite testi kombinasyonu IND sunulmadan önce tamamlanabilir.
⑸Kanserojenite:İlaç onayından önce kanserojenlik testi tamamlanmalıdır.
⑹Üreme Toksisitesi:Üreme sistemiyle ilgili gözlemler ve değerlendirmeler, üreme toksisitesinin ön değerlendirmesi için IND'nin sunulmasından önce tekrarlanan doz toksisite testlerine dahil edilmelidir; klinik çalışmalarda sıkı kontrasepsiyon yeterlidir. Aşama I/II üreme toksisitesi çalışmaları, büyük-ölçekli klinik denemelerden önce tamamlanmalı ve Aşama III üreme toksisitesi çalışmaları onaylanmadan önce tamamlanmalıdır.
⑺Fototoksisite:IND sunulmadan önce fototoksisite değerlendirmesi tamamlanmalıdır. Molar absorptivitenin 1000 M-1cm-1'den büyük olması durumunda, fototoksisite riskinin mevcut olduğu kabul edilir ve büyük ölçekli klinik denemelerden önce fototoksisite testi yapılmalıdır.
4. Toksikoloji testlerinde dozlar nasıl ayarlanmalıdır? En yüksek doz nasıl seçilmelidir?
Cevap:"İlaç Tekrarlanan Doz Toksisitesi Testleri için Teknik Kılavuz İlkeleri"ne atıfta bulunarak, "Prensip olarak, yüksek dozlar hayvanlarda bariz toksik reaksiyonlara neden olmalı, düşük dozlar hayvanlardaki veya klinik kullanımdaki etkili doza eşdeğer veya bundan daha yüksek olmalı ve orta dozlar, toksisitenin doz{0}yanıt ilişkisini incelemek için toksik mekanizma ve özelliklere dayalı olarak yüksek dozlar ile düşük dozlar arasında ayarlanmalıdır."
Uygulamada, toksikoloji testlerinin pahalı maliyeti göz önüne alındığında, birkaç-insan olmayan primatla doz aralığı bulma testi (DRF) yapmak en maliyet-etkili ve iş gücünden- tasarruf sağlayan yöntemdir. DRF testlerine yönelik doz ayrıca, erken PCC tespiti ve farmakolojik çalışmalar sırasında yürütülen ön güvenlik çalışmalarına dayalı olarak ayarlanmalıdır. Artık pek çok kurum, M3 (R2)'de bahsedildiği gibi -GLP olmayan testler olan DRF testlerinin yanı sıra, hayvan kullanımını azaltmak için 3R prensibini takip ederek akut toksisite testleri de yürütmektedir.
Düşük, orta ve yüksek doz grupları için genellikle 2-3 kat aralık kullanılır. Resmi toksikoloji testlerinde ideal durum, yüksek doz grubunun belirgin toksisite gösterebilmesi ve düşük veya orta doz gruplarının NOAEL olarak kullanılabilmesidir.
Ayrıca en yüksek dozun seçimi için M3 (R2) standart yanıtları da sağlar. Basit bir ifadeyle, toksikolojideki en yüksek doz, ya tolere edilen maksimum doz (MTD) ya da maksimum uygulanabilir doz (MFD, ürün ve hayvan özelliklerine göre hayvanların tolere edebileceği maksimum doz olarak anlaşılabilir) olmalı ya da maruz kalma doygunluğuna ulaşmalı ya da maruz kalma düzeyi yeterince yüksek olmalıdır (amaçlanan klinik dozun 50 katına ulaşmalıdır). Genel olarak, amaçlanan klinik doz 1 g/gün'e ulaşmadığı ve 1000 mg/kg maruziyet düzeyi klinik maruziyet düzeyinin 10 katına ulaşmadığı sürece 1000 mg/kg/gün yeterli kabul edilir; bu durumda dozu klinik maruziyet düzeyinin 10 katına veya 2000 mg/kg/gün'e veya MFD'ye daha da arttırmanız gerekir.
5. Klinik dışı güvenlik araştırmalarında hangi çalışmaların GLP'yi izlemesi gerekiyor, hangilerinin izlemesi gerekmiyor?
Cevap:Farmakolojik ve farmakokinetik çalışmaların GLP'yi takip etmesi gerekmez; güvenlik farmakolojisi, genotoksisite, üreme toksisitesi ve tekrarlanan doz toksisitesi çalışmalarının ise GLP'yi takip etmesi gerekir.
6. Klinik dışı tekrarlı doz toksisitesi çalışmalarının süresi ne kadardır?
Cevap:Klinik araştırmanın yürütülmesini ve pazar onayını desteklemek için süre gereklilikleri farklıdır ve klinik araştırmaların doz periyoduna özel olması gerekir. Örneğin multipl sklerozlu hastalar için planlanan minimum klinik araştırma süresi iki yıldır. Bu nedenle, multipl skleroz hastalarını klinik araştırmalara kaydederken, 6-aylık kemirgen ve 9-aylık kemirgen dışı-kronik toksisite çalışması gereklidir ve bu, pazar onayını desteklemek için yeterlidir. Onkoloji dışı ilaçlar için, insanlarda ilk kez yapılan klinik deneylerde 4 haftayı aşmayan bir dozlama süresini desteklemek amacıyla genellikle 4 haftalık bir kronik toksisite çalışması kullanılır.
7. Klinik dışı güvenlik değerlendirmesi için deney hayvanları nasıl seçilir?
Cevap:Genellikle iki tür hayvan kullanılır; kemirgenler ve fareler tercih edilir, kemirgen olmayanlar ve Beagle köpekleri tercih edilir. Elbette belirli ürüne-özel analiz ilkelerine de uyulmalıdır. Küçük moleküller için tür seçiminde esas olarak, insanlara benzer hayvanlardaki araştırma ürününün metabolik özellikleri dikkate alınmalıdır. İnsanlara benzer metabolik özelliklere sahip türlerin, yani insanlara benzer miktar ve türde metabolitlere sahip türlerin seçildiği "CD-1 Fareleri, SD Sıçanları, Beagle Köpekleri, Sinomolgus Maymunları ve İnsan Karaciğer Mikrozomlarındaki Araştırma Ürünleri Metabolitlerinin Analizi ve Tanımlama Testi"ne referans yapılabilir. Ayrıca seçilen türün araştırma ürününe duyarlı olması gerekmektedir. Geçmiş deneyimlere dayanarak, küçük moleküllü bir ilacın Beagle köpeklerindeki metabolik özellikleri insanlara benzer ancak düşük maruziyetli olabilir.
